一、設備準備

1、安裝與環(huán)境要求：將培養(yǎng)箱放置在平穩(wěn)的臺面上，避免振動，遠離陽光直射、通風口或其他熱源。室溫應在 15°C 至 30°C 之間，濕度保持在 30%-70%，確保設備附近電源接地良好，使用穩(wěn)定的電壓。

2、設備檢查：檢查電源連接是否牢固，CO?氣瓶壓力是否充足（通常需配備 99.5% 純度以上的醫(yī)療級 CO?），確保門封條完好無損，檢查濕度盤內(nèi)水量是否足夠。

3、開機初始化：插入電源，開啟主電源開關，等待顯示屏啟動，查看自檢結果，確認溫度、濕度和 CO?濃度顯示正常，無報警提示。

二、參數(shù)設置

1、溫度設置：按操作界面上的 “溫度" 設置按鈕，輸入目標溫度值（如 37°C，適合大多數(shù)哺乳動物細胞培養(yǎng)），確認并保存，系統(tǒng)會自動調(diào)整至設定溫度。

2、CO?濃度設置：按操作界面上的 “CO?濃度" 設置按鈕，輸入目標 CO?濃度值（一般為 5%），確認并保存，設備開始調(diào)整內(nèi)部 CO?濃度，確保氣體供應正常，觀察濃度是否穩(wěn)定。

3、濕度管理：加入適量去離子水或蒸餾水至濕度盤，避免使用自來水以防止水垢堆積。默認濕度一般保持在 90%-95% RH，無需手動調(diào)節(jié)。

4、校準：溫度校準，根據(jù)標準溫度計核實設備內(nèi)實際溫度是否與設定值一致；CO?校準，定期使用校準氣體（如 5% CO?）檢查和調(diào)整傳感器。

三、樣品處理與擺放

1、樣品準備：

樣品容器（如培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿）需提前滅菌，確保樣品無污染。

2、樣品擺放：

將樣品均勻放置在培養(yǎng)箱內(nèi)的擱板上，避免過于密集。

保留足夠的氣流通道，以確保箱內(nèi)溫濕度和CO?濃度均勻。

1、高溫滅菌：

清空培養(yǎng)箱內(nèi)部，移除所有實驗樣品、培養(yǎng)皿以及試劑瓶。

取出可拆卸的內(nèi)部組件（如擱架、濕度水槽、CO?傳感器等），傳感器通常不耐高溫，必須取出或使用保護罩（根據(jù)具體型號說明）。

關閉CO?鋼瓶，斷開連接。

在控制面板上選擇“高溫滅菌模式"或“Sterilization Cycle"，系統(tǒng)會默認設置至140°C，時間通常為12小時（包括升溫、滅菌、降溫三個階段）。無需額外調(diào)整，直接確認運行。

滅菌程序結束后，培養(yǎng)箱會自動冷卻至安全溫度（通常在40°C以下），方可打開門。

冷卻完成后，將拆卸的組件（濕度水槽、擱架、傳感器等）重新安裝回培養(yǎng)箱。

重新連接CO?鋼瓶，確保氣體供應正常。

2、手動滅菌（如培養(yǎng)箱內(nèi)部組件不耐高溫）：

使用無腐蝕性的消毒劑（如70%乙醇或過氧化氫溶液）對內(nèi)部進行清潔。

用無絨布擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、門封條和擱架。

對濕度水槽單獨浸泡消毒，并清洗。

如培養(yǎng)箱不自帶紫外線燈，可使用外置UV燈進行滅菌。將紫外線燈放置于培養(yǎng)箱內(nèi)部，保持門關閉，開啟UV燈運行30分鐘至1小時。